La prueba ELISA detecta numerosas enfermedades, por lo que ha sido ampliamente utilizada en medicina y más. Sin embargo, la prueba ELISA es mejor conocida por su diagnóstico de la enfermedad de Lyme. ¿Qué es la prueba ELISA? ¿Cómo interpretar los resultados? ¿Cuál es el precio de la prueba?

Contenido:

  1. Prueba ELISA - ¿Qué detecta? Uso del ELISA
  2. Prueba ELISA - ¿Qué es la prueba?
  3. Prueba ELISA y enfermedad de Lyme: ¿cuándo realizarla?
  4. Prueba ELISA - precio. ¿Cuánto cuesta una prueba ELISA?
  5. Prueba ELISA - resultados. ¿Pueden ser falsos positivos?
  6. Prueba ELISA - resultados. ¿Pueden ser falsos negativos?

La prueba ELISA , es decir, el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, es un método de laboratorio de uso común que sirve, entre otros, para para la detección cuantitativa de anticuerpos en la sangre

Debido a estaprueba ELISAencontradaaplicaciónen el diagnóstico de enfermedades bacterianas, comoenfermedad de Lyme con Lyme

La ventaja del método ELISA es su simplicidad, rápida ejecución y alta sensibilidad. El método ELISA se realiza utilizando placas de plástico especiales con pocillos llenos, por ejemplo, de proteínas de Borrelia (antígenos) y anticuerpos monoclonales específicos, que están diseñados para detectar anticuerpos en la muestra del paciente.

Prueba ELISA - ¿Qué detecta? Uso del ELISA

La alta sensibilidad y la simplicidad del método ELISA lo hicieron aplicable en el diagnóstico de muchas enfermedades, pero es mejor conocido como el método de diagnóstico de la enfermedad de Lyme.

En el diagnóstico de la borreliosis de Lyme, el llamado ELISA indirecto, que permite detectar IgM o IgG específicas en el material ensayado. De la misma forma, se pueden detectar anticuerpos con fines diagnósticos:

  • infecciones virales: virus del herpes (herpes, herpes zoster, Epstein-Barr, citomegalovirus), VIH, virus de la hepatitis (VHB y VHC)
  • infecciones por protozoos: toxoplasmosis, giardiasis
  • enfermedades autoinmunes: enfermedad celíaca (anticuerpos anti-tTG o anti-DPG), enfermedad de Hashimoto (anticuerpos anti-TG y anti-TPO), enfermedades inflamatorias intestinales (anticuerpos anti-ASCA y anti-ANCA)
  • enfermedades parasitarias y alergias,en el que se detectan anticuerpos IgE específicos. Su mayor nivel puede indicar la presencia de alergias, por ejemplo, al polen y a los alimentos, o invasiones parasitarias (tenia armada, lombriz intestinal humana)

También hay modificaciones en el método ELISA (el llamado ELISA sándwich), que permiten la detección de una muestra analizada de proteínas distintas de los anticuerpos. Entonces el objetivo de la investigación es detectar en el material biológico:

  • fragmentos de virus o bacterias, generalmente estos son antígenos específicos de un patógeno dado
  • hormonas séricas, por ejemplo, estrógeno, prolactina, TSH, fT4, cortisol
  • enzimas, por ejemplo, calprotectina, elastasa pancreática, fosfatasa alcalina
  • marcadores tumorales, por ejemplo, CA-125
  • presencia de drogas en el suero

Este método también se utiliza en la industria alimentaria, donde se pueden detectar trazas de alérgenos (p. ej., leche, cacahuetes), OMG o toxinas en los alimentos.

Prueba ELISA - ¿Qué es esta prueba?

El diagnóstico de, p.

Los anticuerpos se prueban en dos clases, IgM e IgG. Las IgM son los primeros anticuerpos que aparecen en el cuerpo al entrar en contacto con bacterias y disminuyen con el tiempo.

Su lugar lo ocupan anticuerpos IgG más persistentes que pueden permanecer en el cuerpo durante varias docenas de años.

De esta manera, la presencia de bacterias en el cuerpo se comprueba indirectamente mediante la detección de anticuerpos dirigidos específicamente contra las espiroquetas de Borrelia.

Los anticuerpos en varias etapas de la infección pueden dirigirse contra una variedad de proteínas de Borrelia. Por ejemplo, en una etapa temprana es la proteína p41.

En las etapas posteriores, comienzan a aparecer más y más proteínas, como p21, p30, p39, p43. Esta es la razón por la cual el diagnóstico de la enfermedad de Lyme es extremadamente difícil.

La selección de proteínas bacterianas es extremadamente importante para que la prueba tenga un alto valor diagnóstico. Por lo tanto, de forma rutinaria en el diagnóstico de la enfermedad de Lyme, se deben utilizar pruebas ELISA de II o III generación, en las que se seleccionan los conjuntos de proteínas para obtener el resultado más fiable.

Prueba ELISA y enfermedad de Lyme. ¿Cuándo actuar?

La borreliosis de Lyme es una enfermedad bacteriana causada por la bacteria Borrelia burgdorferi y sus muchas variedades.

El diagnóstico de la enfermedad no es fácil debido a la complejidad de la respuesta inmune contra Borrelia y las imperfecciones de los métodos de laboratorio.

El método de laboratorio más utilizado es el método ELISA de alta sensibilidad que detecta anticuerpos específicos producidos contra proteínas bacterianas.

En el diagnóstico de la borreliosis de Lyme se utiliza un método ELISA indirecto en el que se distinguen las siguientes etapas:

  • incubación de los pocillos en la placa con material recogido del paciente, por ejemplo, suero. Si hay anticuerpos contra Borrelia en el material analizado, se unen a las proteínas en el fondo del pozo de reacción
  • luego el exceso de suero se enjuaga con un líquido de lavado especial (tampón) y el llamado conjugado, es decir, un anticuerpo vinculado a una enzima que se une a anticuerpos previamente vinculados en los pocillos de reacción
  • El sustrato para el conjugado se agrega más tarde y no hay (positivo) o reacción de color (negativo)
  • el último paso es la lectura por parte del lector (espectrofotómetro) de la concentración de anticuerpos contra Borrelia en el suero del paciente

El método ELISA para la enfermedad de Lyme se realiza con sangre, y en el caso de síntomas neurológicos (neuroborreliosis), también con líquido cefalorraquídeo.

El líquido sinovial no debe analizarse ya que existe una alta probabilidad de resultados falsos positivos.

La base para el diagnóstico de la enfermedad son los síntomas clínicos que lo indican, confirmados por los resultados de las pruebas de laboratorio.

La adición de un resultado de laboratorio sin la presencia de síntomas no autoriza el diagnóstico de la enfermedad de Lyme, ya que se ha demostrado que los anticuerpos contra las espiroquetas de Borrelia también se detectan en personas sanas.

El diagnóstico serológico de la borreliosis de Lyme comienza con una prueba de detección ELISA semicuantitativa. Si el resultado es negativo, significa que no se han detectado espiroquetas de Borrelia o el resultado es falso negativo.

Si el resultado es positivo o débilmente positivo (equivocado), prueba de Western blot confirmatoria, que es altamente específica.

Esto es para confirmar la "veracidad" de los resultados obtenidos con el método ELISA. Durante el diagnóstico, no puede omitir ninguno de los pasos anteriores y, por ejemplo, realizar un diagnóstico mediante el método Western blot o realizar un diagnóstico basado en un resultado positivo únicamente mediante el método ELISA.

En Polonia, el diagnóstico de la enfermedad de Lyme a menudo termina en la primera etapa de detección, lo que provoca una interpretación errónea de los resultados positivos o débilmente positivos.

Vale la pena saberlo

Prueba ELISA - precio. ¿Cuánto cuesta una prueba ELISA?

La prueba cuesta alrededor de 60zlotys y se hace de inmediato. Sin embargo, puede esperar unos tres meses para obtener los resultados de la referencia.

Prueba ELISA - resultados. ¿Pueden ser falsos positivos?

Los resultados falsos positivos resultan de la reactividad cruzada de los anticuerpos IgM con otras proteínas. Los anticuerpos producidos por el cuerpo pueden reconocer "incorrectamente" un antígeno de otros microorganismos como el antígeno de Borrelia.

Los "errores" más comunes ocurren en personas infectadas con treponema pallidum, virus del herpes y en personas con lupus eritematoso sistémico y otras enfermedades reumáticas.

Prueba ELISA - resultados. ¿Pueden ser falsos negativos?

Pueden aparecer resultados negativos falsos en la etapa temprana de la infección, luego la prueba debe repetirse después de aproximadamente 3-4 semanas. Se llama ventana serológica, es decir, el período inicial de infección en el que el cuerpo aún no ha "logrado" producir anticuerpos específicos.

De manera similar, en personas inmunocomprometidas que no producen suficientes anticuerpos.

Un gran problema, sobre todo en infecciones muy intensas, es la aparición de las denominadas complejos inmunes que consisten en antígenos de espiroquetas de Borrelia y anticuerpos específicos para ellos.

Esto hace que los anticuerpos sean "invisibles" para los métodos comúnmente utilizados como ELISA, y aunque están presentes en el material analizado, no pueden detectarse.

En tales casos, el laboratorio puede usar la descomposición de los complejos inmunes. Este tratamiento está diseñado para liberar los anticuerpos. Sin embargo, este método no es muy utilizado debido a la f alta de estandarización en los laboratorios.

Vale la pena saberlo

¿Por qué no es fácil diagnosticar la enfermedad de Lyme?

Esto se debe a la complejidad de la respuesta inmune contra Borrelia ya las limitaciones de los métodos de laboratorio. La diversidad de variedades y la aparición de nuevas infecciones causantes de infecciones, especialmente en el continente europeo, no facilita el desarrollo de métodos de diagnóstico eficaces.

Recientemente han aparecido más variedades en Europa, como Borrelia bissetii, Borrelia valaisiana y Borrelia spielmanii. Además, en el cuerpo, las espiroquetas de Borrelia pueden convertirse en quistes o permanecer en lugares del cuerpo inaccesibles para las células del sistema inmunitario.

Siendo así "invisibles" para el sistema inmunológico. Además, se ha demostrado que los tejidos pueden contener fragmentos de bacterias que tienen propiedades fuertemente proinflamatorias. Se cree que son responsables de los síntomas crónicos de la enfermedad de Lyme, a pesar de los resultados negativos del estudio.laboratorio

Referencias

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Sobre el AutorKarolina Karabin, MD, PhD, bióloga molecular, diagnosticadora de laboratorio, Cambridge Diagnostics PolskaBióloga de profesión, especializada en microbiología, y diagnosticadora de laboratorio con más de 10 años de experiencia en labores de laboratorio. Graduado de la Facultad de Medicina Molecular y miembro de la Sociedad Polaca de Genética Humana Jefe de becas de investigación en el Laboratorio de Diagnóstico Molecular en el Departamento de Hematología, Oncología y Enfermedades Internas de la Universidad Médica de Varsovia. Defendió el título de doctora en ciencias médicas en el campo de la biología médica en la 1ª Facultad de Medicina de la Universidad Médica de Varsovia. Autor de numerosos trabajos científicos y de divulgación científica en el campo del diagnóstico de laboratorio, la biología molecular y la nutrición. Diariamente, como especialista en el campo del diagnóstico de laboratorio, dirige el departamento de contenido de Cambridge Diagnostics Polska y coopera con un equipo de nutricionistas en la CD Dietary Clinic. Comparte su conocimiento práctico sobre diagnóstico y dietoterapia de enfermedades con especialistas en conferencias, sesiones de capacitación y en revistas y sitios web. Está particularmente interesada en la influencia del estilo de vida moderno en los procesos moleculares del cuerpo.

Categoría:

Investigación